随着医疗和娱乐大麻的使用获得更广泛的接受，正在制定法规，要求对含有大麻的消费品进行测试。合法供应的大麻植物和含大麻的可食用产品都经过了农药、重金属、残留溶剂和其他有害物质的检测。霉菌毒素是另一类污染物，国家法规已为其规定了最高允许水平。在出售给消费者的大麻产品中，总黄曲霉毒素 G1、G2、 B1和  B2的最高允许水平设定为 < 20 ppb，而赭曲霉毒素A的最高允许水平设定为 < 20 ppb。

 Pickering开发了一种简单而灵敏的方法来分析大麻植物和食用产品中的黄曲霉毒素 B1、B2、G1、 G2和赭曲霉毒素 A。使用免疫亲和纯化柱分离霉菌毒素并使用荧光检测进行分析。为了提高黄曲霉毒素  B1和  G1的灵敏度，在检测器之前安装了一个在线光化学反应器。该方法使用标准的  HPLC设备，允许实验室轻松测定低于州法规规定限值的霉菌毒素。

方法

黄曲霉毒素 B1、B2、G1、 G2和赭曲霉毒素  A的分离

使用手持式均质器将  1克精细研磨的样品与提取溶液（ 10毫升甲醇/水 80:20、 5毫升己烷、 0.1克氯化钠）混合。 离心  10分钟。 将  2 mL水层与  12 mL含有  4% Tween 20的  PBS缓冲液（pH 7.2）混合。以  1-2滴/秒的流速将溶液涂抹到AflaOTAClean ^TM免疫亲和柱上。

用  10 mL水以  1-2滴/秒的流速清洗色谱柱。 用两份  1 mL甲醇以  1滴/秒的流速洗脱毒素。 在应用第二部分甲醇之前允许  5分钟，以确保完全破坏抗体-毒素键。

在  55 oC下蒸发至干。 在  1 mL甲醇/水  50:50中复溶。

其他免疫亲和柱，如  Vicam的 AflaOchra HPLC，也可用于样品净化。

分析条件

分析柱：MYCOTOX^TM 反相柱，4.6 x 250 mm，P/N 1612124

保护柱：反相保护柱，部件号  18ECG001 HPLC洗脱液：磷酸钠缓冲液（货号 #1700-1108），

甲醇、乙腈流速：1 mL/min

进样量： 100μL

FLD：黄曲霉毒素激发 365 nm，发射  430 nm黄曲霉毒素  A激发 333 nm，发射 477 nm

校准

 5点校准曲线在  B1的 0.25-5 ppb、 B2的 0.075-1.5 ppb、 G1的 0.248-4.95 ppb、 G2的  0.075-1.5 ppb和赭曲霉毒素  A的 1-10 ppb范围内构建。 相关系数 所有毒素的 R2 > 0.999。 所有校准标准品均在甲醇/水  50:50中制备

回收率

对于所有测试样品， G2的毒素回收率超过 77%， G1为 88%， B2为 73%， B1为 78%，赭曲霉毒素  A为 80%。

UVE光化学反应器流程图

添加  6 ng/g黄曲霉毒素  B1的含有大麻的花生酱曲奇样品的色谱图；  1.8 ng/g黄曲霉毒素 B2；  5.94 ng/g黄曲霉毒素 G1；  1.8 ng/g黄曲霉毒素  G2和  20 ng/g赭曲霉毒素 A

天然被  1.58 ng/g黄曲霉毒素  B1和  0.26 ng/g B2污染的含大麻花生酱曲奇样品的色谱图

大麻花样品空白

加标  6 ng/g黄曲霉毒素  B1的大麻预卷样品的色谱图；  1.8 ng/g黄曲霉毒素 B2；  5.94 ng/g黄曲霉毒素 G1；  1.8 ng/g黄曲霉毒素  G2和  20 ng/g赭曲霉毒素 A

加标  6 ng/g黄曲霉毒素  B1的大麻花序样品的色谱图；  1.8 ng/g黄曲霉毒素 B2；  5.94 ng/g黄曲霉毒素 G1；  1.8 ng/g黄曲霉毒素  G2和  20 ng/g赭曲霉毒素 A

加标  6 ng/g黄曲霉毒素  B1的含大麻巧克力曲奇饼干样品的色谱图；  1.8 ng/g黄曲霉毒素 B2；  5.94 ng/g黄曲霉毒素 G1；  1.8 ng/g黄曲霉毒素  G2和  20 ng/g赭曲霉毒素 A

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