亚硝酸盐和硝酸盐被添加到食物中以保持颜色和味道，并防止食物变质。它们还用于食品中，因为它们具有抗微生物特性。 使用硝酸盐肥料和/或牲畜粪便可能会使蔬菜和绿叶蔬菜的含量更高。 食品中的亚硝酸盐水平也可能通过在加工过程中将硝酸盐还原为亚硝酸盐而产生。

用于分析硝酸盐的  AOAC官方方法  993.031涉及使用海绵状镉进行还原，镉具有毒性和致癌性。 FDA通过使用氯化钒  (III)和加热将硝酸盐柱后还原为亚硝酸盐来改进此方法。 亚硝酸盐与这种改良的  Griess试剂反应，产生在  535 nm处具有最大吸光度的红色发色团。 Pickering进一步改进了这种方法，用甲磺酸代替腐蚀性盐酸。

方法

分析条件

分析柱： Thermo Scientific Ion PacTM AS9-HC色谱柱（货号 051786）或 AS22（货号 064137）

柱温：50°C

流速： 1毫升/分钟

流动相：1.8 mM Na₂CO₃ / 1.7 mM NaHCO₃ 用于  AS9 - HC色谱柱

或者

4.5 mM Na₂CO₃ / 1.4 mM NaHCO ₃用于  AS22色谱柱

进样量： 10μ L柱后条件

柱后系统： Onyx PCX或  Pinnacle PCX反应器体积：0.5 mL

反应器温度：100°C

试剂流速：0.1 mL/min

试剂： (i) 1%氯化钒  (III)的  20%甲磺酸溶液

 (ii) 1%间硝基苯胺的  20%甲磺酸溶液

(iii) 1% N-(1-萘基)乙二胺

 20%甲磺酸中的二盐酸盐

将  50 mL (i)和  (ii)与  1.25 mL (iii)混合并使用  20%甲磺酸稀释至 250 mL

检测：UV/VIS，λmax = 535 nm

样品制备

向  50 mL离心管中的  5 g婴儿食品中加入  25 mL 50-60° C的水（适用于蔬菜）或  15 mM醋酸钠（适用于水果）并摇晃  10分钟。 加入  12.5 mL乙腈，用水（蔬菜）或醋酸钠（水果）定容至 50 mL。 将混合物以  5000 rpm的速度离心  15分钟。 用  0.45μ m尼龙滤膜过滤上清液并稀释至线性范围内

注：

柱后试剂溶液储存在塑料或特氟龙容器中。

所有溶液在使用前均通过 0.45μ m尼龙过滤器过滤。

在用于氧化之前，应检查硝酸盐/亚硝酸盐标准品。

应检查样品  pH以确定提取溶液的选择，因为酸性  pH有利于亚硝酸盐转化为硝酸盐。

20 ppm 亚硝酸盐和硝酸盐标准品

亚硝酸盐和硝酸盐的校准曲线

致谢

John A. Casanova，食品和药物管理局，60 8th Street, Atlanta, GA 30309

参考

 1. AOAC - AOAC International (2000)第  17版的官方分析方法，第  50.1.11节。

 2.使用含钒  (III)的  Griess试剂进行柱后衍生化和同时测定婴儿食品中的亚硝酸盐和亚硝酸盐，John A. Casanova、Lois K. Gross、 Sarah E. McMullen和Frank Schenck， Food and药物管理局，60 8th Street, Atlanta, GA 30309。

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