生物胺食品和生理样品的分析
组胺和其他多胺如腐胺、尸胺、亚精胺和精胺是分解产物。 特别是组胺水平已被用作鱼类分解程度的监管指南。 此外,组胺和酪胺水平对葡萄酒和奶酪的生产商很感兴趣。
多胺、亚精胺、精胺和腐胺在肿瘤和损伤(例如烧伤组织)中升高。 事实上,循环和尿中多胺的水平是全身损伤的一个指标。 可以监测饮食和其他方式对恢复的影响的水平。
该方法采用离子交换色谱法,因此在提取后,离心/过滤是唯一必要的样品制备。
方法
分析条件
分析柱:ALKIONTM 阳离子交换, K+型,4 x 150 mm,货号 9410917
保护柱:ALKIONTM 保护柱,3 x 20 mm,货号 9493020
柱温:45° C流速:0.8 mL/min
流动相:K600、K563、K130
提取程序
称量 10 g样品到一个小的玻璃搅拌杯中(此时应添加任何强化剂)。加入 50 mL萃取溶液( 80% HPLC甲醇和 20% 0.1N HCl)并匀浆两分钟。离心五分钟。将等份的上清液与流动相 (K600)混合。允许在 -4° C下凝固 15分钟,然后离心 5分钟。过滤上清液( 0.45μ m尼龙)并放入自动进样器小瓶中。
柱后条件
柱后系统:Onyx PCX、 Pinnacle PCX或 Vector PCX
反应器体积: 0.15毫升
反应器温度:45°C
试剂:300 mg OPA、2 g ThiofluorTM、3mL的 30%Brij® 35在950mL的OD104中
流速: 0.3 mL/min检测:荧光计
lex :330nm,lex:465nm
鱼样品色谱图
校准标准的色谱图,100μM
流速:0.8 mL/min,柱温:45 oC,进样量:10 mL
鱼露样品的色谱图
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