通过  HPLC和柱后光化学衍生法分析食品和补充剂中的生物可利用烟酸(维生素 B3

烟酸(烟酸)是一种对人体健康很重要的必需营养素。 游离烟酸和烟酰胺具有相似的生物活性,两者都用作膳食补充剂以预防维生素  B3缺乏症。 在补充剂中,由于没有烟酸的常见副作用,例如皮肤潮红,通常首选使用烟酰胺。

欧洲标准化委员会已批准使用柱后光化学衍生的  HPLC方法来测量食品中的维生素 B3 紫外线照射将烟酸和烟酰胺转化为高荧光衍生物。  Pickering UVETM光化学反应器添加到任何  HPLC系统中,可以对各种不同基质中的烟酸和烟酰胺进行高灵敏度和选择性分析。

 

方法

校准  -校准范围:烟酸: 0.1  50μg/mLR2=0.999;烟酰胺: 0.1  50微克/毫升, R2=0.998样品制备 下面描述的样品制备旨在测量食品中生物可利用的(或游离的)烟酸和烟酰胺。可以采用不同的程序来制备用于总烟酸分析的样品。  -食品样品:向  5 g样品中加入 30 mL 0.1 N HCl。高速搅拌  2-3分钟,然后在 100 oC 下加热混合物  1小时。将混合物冷却至室温,转移到量筒中,并用去离子水将体积调节至 50 mL。根据需要用水进一步稀释以拟合校准曲线。通过  0.45μ m过滤器过滤溶液。  -对于高蛋白/高脂肪基质:按照上述说明进行。过滤后,吸取  4 mL溶液到离心管中。在水中加入  1 mL 50% (w/v)的三氯乙酸溶液以沉淀蛋白质。将混合物在冰水浴中冷却  5分钟。离心并通过  0.45μ m注射器过滤器过滤。  -膳食补充剂:彻底混合至少  10粒细磨胶囊/片剂的内容物。将  100毫克部分溶解在  100毫升的去离子水中。根据需要用水进一步稀释以拟合校准曲线。通过  0.45μ m过滤器过滤。

 

分析条件

分析柱:ThermoHypersilAquasil C18 (150 x 4.6 mm) 温度:40 oC

流速: 1毫升/分钟

流动相:甲醇/磷酸盐缓冲液( 0.035 mol/L磷酸二氢钾调整为 pH 4.45)。 梯度条件见表 1

进样量:20 uL

柱后条件

 UVETM光化学反应器检测:FLDEx 322 nmEm 370 nm

支持
    1 ug/mL 烟酸和烟酰胺校准标样的色谱图                                                                                生猪肉样品的色谱图

新鲜豌豆样品的色谱图                                                                                               燕麦谷物样品的色谱图

新鲜番茄样品的色谱图                                                                                                                  复合维生素 B 膳食补充剂的色谱图

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